新型熒光標(biāo)記物DyLight系列

DyLight系列為近幾年新推出的熒光標(biāo)記物，具有光飽和度強(qiáng)、發(fā)光更持久的特點(diǎn)

現(xiàn)在用DyLight488和常用的FITC作一對(duì)比    （Fluorescein Isothiocyanate，異硫氰酸熒光素）是一種綠色熒光團(tuán)，在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)里，經(jīng)常被用于熒光團(tuán)標(biāo)記到相應(yīng)的檢測(cè)分子，如抗體上，是目前應(yīng)用最廣泛的熒光素。由于FITC是小分子化合物，每一個(gè)抗體可標(biāo)記幾個(gè)FITC分子，IgM通常用小分子的熒光素標(biāo)記，如FITC、Cy3/5、Texas Red等。

我們知道，F(xiàn)ITC的綠色熒光強(qiáng)度肉眼觀察已經(jīng)很亮了，但是從上面的圖可見，與Cy2相比還是偏弱，而DyLight 488則更勝一籌。DyLight是一種新型的熒光分子，與傳統(tǒng)的熒光團(tuán)如FITC、Rhodamine、Texas Red等相比，具有更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度、更高的光學(xué)穩(wěn)定性。同時(shí)，DyLight種類齊全，如Dylight 405就是藍(lán)色熒光，Dylight 488是綠色熒光，可完全替代FITC；完全替代Cy3和Rhodamin的Dylight 549；替代Texas Red的Dylight 594；Dylight 633和Dylight 649則是更強(qiáng)的紅色熒光；另外，Dylight還有適配Odyssey系統(tǒng)的近紅外和遠(yuǎn)紅外二抗，分別是Dylight 680和DyLight 800。

FITC本身性質(zhì)穩(wěn)定，能與蛋白質(zhì)結(jié)合，是檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)最常用的熒光探針。FITC的最大缺點(diǎn)是淬滅快，因此要和抗淬滅劑一起使用。DyLight 488則完全不一樣，如右圖所示，不同熒光團(tuán)在含有抗淬滅劑（90%甘油的PBS）里的熒光淬滅情況，由圖可見。FITC的淬滅最快，Cy2其次，而Dylight 488和Alexa 488都具有很好的光穩(wěn)定性。因此DyLigt非常適合熒光拍照。那么Dylight到底是一種什么樣的熒光團(tuán)？不管在結(jié)構(gòu)以及功能和應(yīng)用上，Dylight都是一種新的熒光團(tuán)，與傳統(tǒng)的熒光團(tuán)相比，其分子量相對(duì)較小， 因此一個(gè)大分子上可以標(biāo)記更多的Dylight，同時(shí)單個(gè)的Dylight熒光團(tuán)，其熒光強(qiáng)度更強(qiáng)，特異性更好；Dylight對(duì)光更穩(wěn)定，這意味著其具 有更高的抗淬滅性，不像FITC因?yàn)榭焖侔l(fā)生淬滅而無(wú)法及時(shí)捕捉到熒光圖像。

價(jià)格上，Dylight的熒光二抗與常規(guī)熒光二抗相比，具有更高的性價(jià)比，一般來(lái)說(shuō)，Dylight的價(jià)格比常規(guī)二抗只高50%左右，但是Dylight的效價(jià)通常是常規(guī)熒光二抗的2-4倍左右，因此就最終的性價(jià)比，Dylight更勝一籌。如EarthOx的FITC-Goat anti-mouse IgG（E031210），100μl和500μl報(bào)價(jià)分別是￥160和￥640；而相應(yīng)的EarthOx的 Dylight 488-Goat anti-mouse IgG（E032210），100μl和500μl報(bào)價(jià)分別是￥240和￥960，但在使用時(shí)，比如免疫熒光實(shí)驗(yàn)(IF)，E031210推薦稀釋比率分別為1:100～1:400，而E032210推薦稀釋比率1:100～1:800。可見，即使不考慮Dylight更高的熒光強(qiáng)度、更好的光學(xué)穩(wěn)定性，但就價(jià)格來(lái)說(shuō)，Dylight熒光二抗也具有更高的性價(jià)比。下圖為EarthOx原裝進(jìn)口DyLight 488標(biāo)記，針對(duì)不同種屬的二抗產(chǎn)品，冠星宇科技均提供現(xiàn)貨包裝：

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